Estudio de la diferenciación in vitro de células madre embrionarias monoparentales (androgenéticas y partenogenéticas)

Abstract

Para estudiar el fenómeno de la impronta del genoma, que se define como modificación epigenética del ADN que provoca una expresión diferencial de los alelos en función del cromosoma del que se hereden, hemos utilizado como modelo las células madre embrionarias tanto monoparentales como biparentales. Dichas células tienen un comportamiento que se ha asimilado con el de las células de la masa celular interna del blastocisto, ya que se obtienen a partir de ésta y se pueden mantener indiferenciadas y totipotentes en cultivo. Sin embargo, no se ha establecido de forma clara cual es la capacidad de diferenciación de las células madre embrionarias androgenéticas y partenogenéticas en los momentos más tempranos del desarrollo. Así pues, nuestra hipótesis de trabajo planteaba la posibilidad de que la impronta podría manifestarse en el desarrollo embrionario preimplantado, afectando a las células de la masa celular interna de los embriones androgenéticos y partenogenéticos, y provocando alteraciones del proceso de diferenciación de las mismas. Para comprobarlo hemos analizado la expresión de una serie de marcadores de indiferenciación, tratando de encontrar diferencias en la expresión de los mismos que obedezcan a su distinta contitución genómica. Los resultados han puesto en evidencia que el fenómeno de la impronta del genoma, desde el punto de vista citológico, se manifiesta principalmente en las células madre embrionarias monoparentales androgenéticas. Posteriormente el proceso de diferenciación in vitro confirma esta manifestación de la impronta, ya que si bien no hay diferencias entre las células monoparentales sí las hay con respecto a las biparentales. Nuestros datos también indican que en los embriones monoparentales se encuentra afectado el sistema de transmisión de la señal del LIF a su interior, aunque no su receptor, y que podemos complementar el medio con factor steel con