Utilización de cultivos celulares de alubia "(Phaseolus Vulgaris L.)" habituados a inhibidores de la síntesis de celulosa en la caracterización de la pared celular

Resumo

Se han usado cultivos celulares de alubia (Phaseolus vulgaris L.) habituados a herbicidas inhibidores de la síntesis de celulosa con el objeto de estudiar la plasticidad, así como la dinámica y estructura de la pared celular. Para ello se han utilizado numerosas técnicas bioquímicas, inmunológicas, de microscopía, etc. Mediante la monitorización de la habituación a diclobenil de callos de alubia mediante espectroscopía FTIR asociada a análisis multivariante se reveló la existencia de tres niveles diferentes de habituación (bajo, medio y alto) y que los cambios producidos por la habituación dependían de la concentración del inhibidor y del tiempo que las células crecieron en esa concentración. El estudio de la actividad xiloglucano endotransglucosilasa (XET) en células habituadas a diclobenil mostró una mayor actividad en las células habituadas, junto con un xiloglucano de menor masa molecular; esto podría indicar que la mayor actividad XET funcionaría reforzando la pared celular, debilitada por presentar un menor contenido en celulosa. La habituación a diclobenil y posterior deshabituación (subcultivo de las células habituadas en ausencia de diclobenil) provocó asimismo cambios en la masa molecular y estructura del xiloglucano, estudiados mediante la purificación y estudio de dicha hemicelulosa procedente de células no habituadas, habituadas y deshabituadas. Purificación y caracterización de un ß-1,4-glucano soluble a partir de células deshabituadas a diclobenil; este glucano presentó una masa molecular media de 10 kDa y uno o varios radicales acetilo en los residuos de glucosa, que posibilitarían su mayor solubilidad. Se estudió asimismo la mayor tolerancia de las células deshabituadas frente a otros inhibidores de la síntesis de celulosa; estas células mostraron una gran capacidad de habituación a diclobenil y a isoxaben, además de niveles más altos de actividades enzimáticas relacionadas con la detoxificación de xenobi