Interacción de ácidos nucleicos con acma (9-amino-6-cloro-2-metoxiacridina), complejos de ru (ii) y de cu (ii)

Abstract

Los ácidos nucleicos son biomacromoléculas presentes en todos los organismos vivos que juegan un papel fundamental en la vida celular. Por eso no es de extrañar que desde su descubrimiento hace más de un siglo, hayan proliferado los estudios relacionados con el funcionamiento de esta parte de la maquinaria celular y con ello, se hayan identificado como una diana para el tratamiento de multitud de enfermedades. De hecho, la actividad de numerosos agentes terapéuticos se basa en la interacción con ácidos nucleicos, si bien en algunos casos, el mecanismo de acción no está claro. El cisplatino es un típico ejemplo de droga antitumoral que interacciona con el ADN mediante enlace covalente. Pero también hay drogas que se unen a los ácidos nucleicos mediante interacciones no covalentes como es el caso de los compuestos utilizados en esta tesis doctoral. Para el desarrollo del trabajo de tesis se han utilizado cuatro moléculas procedentes de distintas familias. Por un lado, un derivado acridínico fluorescente, ACMA. Por otro, complejos metálicos tales como areno complejo de Ru (II), [RuCl (pcimeno)( ¿2-N,N-2-pydaT)]BF4, y dos derivados de tiosemicarbazona-Cu (II) (2-piridina carbaldehído tiosemicarbazonato de cobre (II) y 2-piridina carbaldehído 4N-metil tiosemicarbazonato cobre(II)). Se ha realizado el estudio químico físico utilizando diversas técnicas espectroscópicas como absorción UV-Vis, fluorescencia o dicroísmo circular. También se han realizado viscosimetría, electroforesis de anclaje y de unwinding, calorimetría diferencial de barrido y estudios cinéticos mediante la técnica de relajación por salto de temperatura (T-jump). El conjunto de todas estas técnicas han permitido caracterizar el modo de interacción de ACMA con ADN natural (CT-DNA), ADN sintético (poly(dAdT) ¿ poly(dA-dT) y poly(dGdC) ¿ poly(dG-dC)) y con ARN sintético en conformación de doble y triple hélice. También se ha determinado el modo de interacción del arenocomplejo de Ru (II) con CT-DNA. Una vez caracterizados los diferentes modos de interacción se ha estudiado la actividad biológica de estas moléculas mediante diversas técnicas como el test de Ames para determinar la mutagenicidad, MTT para determinar la citotoxicidad en células V79, el ensayo del cometa alcalino y el test de micronúcleos en células con la citocinesis bloqueada para evaluar la genotoxicidad en células V79. La integración de los conocimientos adquiridos al abordar la cuestión desde diversos campos permite discernir no sólo las características de la interacción sino también sus efectos para la vida celular.