Papel etiopatogénico del tabaco y el alcohol en los procesos de fibrogénesis pancreática asociado a pancreatitis crónicaestudio sobre cultivo de células estrelladas pancreáticas

Abstract

La fibrosis pancreática es una característica histopatológica constante de la pancreatitis crónica (PC) y el cáncer de páncreas que conlleva la pérdida de función del tejido. Se considera un proceso dinámico y reversible durante las primeras etapas de su desarrollo. Las células estrelladas pancreáticas (PSC) son las principales efectoras de la fibrogénesis pancreática. En etapa quiescente (inactiva) se encuentran en áreas perivasculares y periacinares captando posibles cambios en la homeostasis del tejido y se caracterizan por tener numerosos gránulos de vitamina A en su interior. Una vez activadas, en respuesta a daño pancreático, cambian a morfología tipo fibroblasto, expresan ¿-actina de músculo liso (¿-SMA), incrementan su tasa de proliferación y de migración y producen grandes cantidades de proteínas de matrix extracelular. En la actualidad se establecen el alcohol y el tabaco como principales factores de riesgo asociados al desarrollo de la PC. Concretamente, el alcohol estimula la activación de las PSC de forma directa y la perpetuación de su fenotipo activado. En lo que concierne al tabaco, éste es el principal factor de riesgo para el cáncer de páncreas y hoy en día se asocia al desarrollo de PC de forma dosis dependiente. Además se ha asociado al desarrollo de fibrosis en otros órganos como pulmón, riñón o corazón. En base a estudios epidemiológicos y experimentales en otros tipos celulares el objetivo principal es estudiar el papel del tabaco como factor independiente y en combinación con el alcohol, en comparación con alcohol sólo, en los procesos asociados a la fibrosis pancreática sobre las PSC. Para ello se aislaron células estrelladas pancreáticas provenientes de rata Sprague dawley y se incubaron con etanol y extracto líquido de tabaco. La activación de las PSC se determinó mediante la proliferación celular (WST-1 y xCELLigence); transdiferenciación celular (expresión de ¿-SMA); capacidad de migración (Wound healing assay y transwell migration assay) y expresión de proteínas de matriz extracelular (colágeno I y fibronectina 1). Se analizó la secreción de fractaquina, como citoquina proinflamatoria, por parte de las PSC en respuesta a alcohol y tabaco y la producción de ROS en respuesta al alcohol y tabaco como indicador de estrés celular. En el presente estudio se demuestra que el tabaco es capaz de ejercer un efecto relevante en el inicio y desarrollo de los procesos de fibrogénesis pancreática asociada a pancreatitis crónica. Concretamente se muestra que el tabaco sólo o combinado con alcohol produce la activación directa de las células estrelladas pancreáticas, estimula la migración, la síntesis de proteínas de matriz extracelular (colágeno I y FNT-1), estimula la secreción de fractalquina y la producción de especies reactivas del oxígeno en las PSCs. Además hemos comprobado que el tabaco y el alcohol tienen un efecto sinérgico, de forma que el tabaco podría ser un factor asociado al desarrollo de fibrosis en pancreatitis crónica de origen alcohólico.