Conjugados oligonucleótido-péptido para el reconocimiento de factores de trasncripción y ADN

Zusammenfassung

Dentro de la familia de factores de transcripción que utilizan el motivo bZIP en su reconocimiento del ADN, destacan las oncoproteínas Fos y Jun. Fos y Jun aparecen expresadas en distintos tipos de células y tejidos y participan en la regulación de numerosos procesos celulares como la proliferación, diferenciación, apoptosis y oncogénesis. La generación y propagación de muchos cánceres está relacionada con la sobreexpresión de Jun, por lo que existe un gran interés en antagonizar su actividad. En este trabajo de tesis se han desarrollado receptores selectivos para la oncoprotéina Jun, en los que una zona derivada de la región rica en leucinas de Fos se ha unido covalentemente a un oligonucleótido de doble cadena que incluye el sitio de unión de Jun TCAT, Para la síntesis de los conjugados oligonucleótido-péptido se han ensayado diferentes estrategias de síntesis convergente y síntesis divergente. Además, es posible llevar a cabo un control temporal de activación y desactiviación de la unión de los híbridos sintetizados a la protéina utilizando oligonucleótidos externos. Por otra parte, en el marco del interés existente en desarrollar derivados peptídicos más pequeños que los factores de transcripción naturales, pero capaces de mimetizar sus capacidades de reconocimiento del ADN, en este trabajo se ha desarrollado una nueva forma de dimerización de las regiones básicas del factor de transcripción GCN4. Esta consiste en unir covalentemente dichas regiones a oligonucleótidos de secuencia adecuada, de forma que al añadir un tercer oligonucleótido formen una estructura de tipo "three way junction". Este sistema permite activar y desactivar la dimerización de los péptidos y, por tanto, ofrece la posibilidad de controlar su interacción con el ADN usando oligonucleótidos externos.