Distinta distribución intracelular de la proteína sigma a de los reovirus aviares en céulas de diferentes especies
- Vázquez Iglesias, Lorena
- Francisco Javier Benavente Martínez Doktorvater
- José Manuel Martínez Costas Co-Doktorvater
Universität der Verteidigung: Universidade de Santiago de Compostela
Fecha de defensa: 12 von Dezember von 2008
- Francisco Javier Rodríguez Berrocal Präsident/in
- Juan Zaldive Torrente Sekretär/in
- Celina Costas Vocal
- José Ignacio Casal Álvarez Vocal
- Rubén Varela Calviño Vocal
Art: Dissertation
Zusammenfassung
En este trabajo analizamos la localización intracelular de la proteína sigma A en células aviares infectadas y transfectadas y encontramos que sigma A se localiza en el nucleolo y en el citoplasma de células aviares y que su presencia en el nucleolo es independiente de factores virales y de las modificaciones que induce la infección viral. También encontramos que la proteína sigma A se localiza en el nucleoplasma de células de mamífero, y experimentos realizados con células permeabilizadas con digitonina indicaron que se mantiene arrestada en el nucleoplasma por interacción con factores celulares específicos de células de mamífero. Por otra parte, estudiamos el transporte de la proteína sigma A al núcleo de la célula y demostramos que sigma A penetra en el núcleo por un mecanismo de transporte selectivo y no por difusión pasiva. Sin embargo, la entrada de sigma A al núcleo no sigue la ruta clásica dependiente de importinas y de secuencias NLS, sino que alcanza el núcleo por un mecanismo independiente de factores citosólicos y de energía. También observamos que la proteína sigma A expresada en células Vero no recircula entre el núcleo y el citoplasma y que su presencia en el núcleo es dependiente del estado transcripcional de la célula. También demostramos que sigma A utiliza el receptor Crm1 para salir del núcleo de células Vero cuando se inhibe la transcripción. Por último, hemos demostrado que la proteína sigma A se asocia y colocaliza en el interior de la célula con la nucleolina de mamífero y que induce su redistribución intracelular.