Actividad de la protimosina"alfa" en la división de las células de mamíferos

Abstract

La Protimosina a(ProTx) es una proteina nuclear ampliamente en todos los tejidos de mamiferos, cuya función se relaciona con la proliferación celular, aunque no son conocidos los mecanismos mediante los cuales esta proteina ejerce su actividad. Con la intención de esclarecer su función, llevamos a cabo la caracterización de componentes celulares que, en los diferentes fraccionados subcelulares de celulas linfoides(NC37), muestran afinidad por ProTz,enlazada a Sepharosa. Este procedimiento nos ha permitido establecer la capacidad de interacción in vitro de ProTa con proteinas como las historias H2A,H2B,H3 y H4 cuya interacción ya habia sido demostrada en otros tipos celulares en nuestro laboratorio, y tambien con la proteina quinasa de fosforila ProTa(ProTaK), cuyo estudio se completa con la investigación de su localización subcelular y evolución de su actividad con el ciclo celular. Para profundizar en la función nuclear de ProTa,investigamos su movilización al núcleo, demostrando, que la interación de ProTa con los nucleos es dependiente de la presencia conjunta de proteinas que interactuan con ella y que estan presentes tanto en los fraccionados subcelulares citoplasmaticos como nucleoplasmáticos. Mediante tecnicas de transferencia o inmunoreacción con anticuerpos especificios, identificamos entre estas proteinas a las Karioferinas B y a; a la proteina Ran y a la proteina RCC-1, relacionada con la actividad de Ran. Esta interacción in vitro evidencia una intervención de estas proteinas en el transporte al núcleo de la ProTa. Dada la aparente implicación de ProTa en los procesos de proliferación celular, investigamos entre las proteinas que interaccionan con ella, algunas de las que pudieran estar relacionadas en el metabolismo del DNA y en el control del ciclo celular. Asi, experimentos de inmunodetección nos permitieron demostrar que la ProTa interactúa con las proteinas PCNA,Cdk2 y ciclina A, implicadas en