Proteínas de infección de SHV-1cinética de síntesis y obtención de anticuerpos monoclonales específicos

Resumo

Hemos estudiado la cinética de síntesis de las proteinas de infección de una cepa local (E-974) del virus SVH-1 (herpesvirus porcino) comparándola con una cepa virulenta (Phylaxia) y una cepa atenuada (Bartha), sobre dos líneas celulares de distinta estirpe, celulas PK-15 (estirpe epitelial) y celulas BHK-21 (estirpe fibroblástica). Hemos observado que el inicio de la síntesis de proteínas virales depende de la línea celular infectada. La cepa local E-974 presentó un patrón de síntesis proteica similar al de la cepa virulenta Phylaxia. Ademas, también se determinaron las diferencias en el procesamiento de las glicoproteínas virales condicionadas por la línea celular infectada, las glicoproteinas gIII y el complejo gII se expresan más abundantemente sobre células fibroblásticas que sobre células epiteliales. La interacción de una infección viral con el medio extracelular se inicia por la expresión de las proteínas de infección en la superficie de la célula infectada, las proteínas que expresan los herpesvirus sobre las células que infectan son de naturaleza glicoproteica por lo que obtuvimos un panel de anticuerpos monoclonales contra estas proteinas y estudiamos su expresión en membrana. La cinética de expresión de las proteínas de infección en la membrana de las células infectadas se estudian utilizando nuestros propios anticuerpos monoclonales mediante citometría de flujo: así determinamos que uno de los monoclonales, el SL1 reconoce al complejo glicoproteico gII a partir de las 6 h p.i., mientras que el anticuerpo monoclonal OQ4 reconoce una proteína de 64 kDa de p.M.A. Que puede ser gIIb a partir de las 8 h p.i. Y de forma más clara en la superficie de la cepa atenuada Bartha. También se obtuvieron anticuerpos capaces de reconocer polipéptidos de 58-52 kDa (EC2) y de 58 kDa (RS9). Los resultados de las cinética de síntesis de proteínas de infección así como la expresión de las proteínas virales en membrana se relac