Contribución a la proteína lana2 a la transformación de las células b infectadas con el virus del sarcoma de Kaposi

Abstract

El virus del sarcoma de Kaposi (KSHV) es el agente causal de enfermedades proliferativas que afectan a células epiteliales, produciendo el sarcoma de Kaposi (KS), y a células B, produciendo la enfermedad multicéntrica de Castleman y el linfoma no-Hod king de efusión primario (PEL). A pesar de que los enfermos con KS responden muy bien al tratamiento con el agente quimioterápico denominado paclitaxel, los enfermos de PEL son relativamente resistentes al mismo. El patrón de expresión génica de KSHV es específico tanto del tipo celular como de la fase de la infección viral. La proteína viral en la que se centran nuestros estudios denominada LANA2 se expresa de forma latente y exclusiva en las células B, sirviendo como marcador diferencial de cé lulas B infectadas latentemente con KSHV. En este trabajo demostramos que LANA2 está implicada en el mecanismo de resistencia al paclitaxel observado en PEL ya que es capaz de modular la dinámica microtubular mediante su interacción con la tubulina p olimerizada, impidiendo la interacción del fármaco con los microtúbulos y previniendo su estabilización en respuesta a la acción del paclitaxel. Como se ha demostrado en estudios anteriores a esta tesis, LANA2 es una proteína multifuncional lo que su giere la existencia de mecanismos que puedan regular sus múltiples actividades. Durante el trabajo realizado en esta tesis identificamos uno de los mecanismos de regulación de la proteína viral. LANA2 se une covalentemente a SUMO1 y SUMO2 in vitro y en células PEL positivas para KSHV. Además, LANA2 se une de forma no covalente a SUMO a través de un dominio SIM. Por otro lado, en este trabajo identificamos una nueva función de LANA2: inducir la desorganización de los orgánulos subnucleares denomi nados PML-NUCLEAR BODIES (PML-NBs), de gran importancia en el control de la proliferación celular y la respuesta antiviral. Nuestros resultados indican que la proteína viral induce la degradación dependiente del proteasoma de las proteínas PML y Sp10 0, dos de sus componentes más importantes. La expresión de LANA2 favorece la unión covalente de cadenas de SUMO2 y ubiquitina a PML y su posterior degradación. Esta degradación depende tanto de la integridad de la lisina 160 de PML como de la capacid ad de LANA2 de unirse a SUMO de forma covalente y no covalente. Además, como consecuencia de la degradación de PML, LANA2 libera la represión transcripcional ejercida por PML sobre el gen de survivina, proteína que desempeña un papel importante en cá