Cambios bioquímicos del metabolismo óseo durante el movimiento ortodóncico

Resumo

La investigación se dividió en tres estudios. Primero: Objetivo: Evaluar la expresión de RANK, OPG, OPN y TGF-beta1 en fluido gingival crevicular (GCF) de dientes sujetos a fuerzas ortodóncicas. Material y Métodos: Estudio piloto clínico randomizado sobre 10 voluntarios a boca partida. Se colocaron gomas elásticas de separación entre segundo premolar y primer molar, con el cuadrante contralateral como control. Las muestras de GCF se recogieron en lado de presión y tensión previo a la colocación de las gomas de separación, a las 24h y a los 7d. Los volúmenes se midieron con un Periotron 8000 y se determinaron las concentraciones totales de proteínas. También se analizaron los niveles de RANK, OPG, OPN y TGF-beta1 con un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzima múltiple. Resultados: Las localizaciones control permanecieron sin cambios en todo el estudio. La concentración de OPG disminuyó en el lado de presión a las 24h, y la cantidad de concentración de RANK se diferenció entre localizaciones control, presión y tensión a los 7d. Los niveles absolutos de TGF-b1 también aumentaron en el lado de presión a los 7d al compararlos con el lado de tensión. Conclusión: El metabolismo óseo se ve afectado por la aplicación de fuerzas sobre los dientes por medio de gomas de separación. Se produce un incremento de la expresión de mediadores de la reabsorción ósea (RANK y TGF-b1) y disminución en la expresión de mediadores de la formación ósea (OPG) en el lado de presión. Segundo: Objetivos: Determinar los niveles de calcitonina (CT) en fluido gingival crevicular (GCF), sus variaciones durante el movimiento ortodóncico temprano tanto en el lado de presión como en el de tensión, y su posible asociación con el dolor experimentado con este tratamiento. Material y Métodos: Quince jóvenes (media: 12.6 años) con requerimiento de cierre de diastema entre incisivos centrales superiores. Recogimos GCF de los lados de presión y tensión del incisivo central superior derecho (experimental) y primer premolar (control), antes y después (1h, 24h, 7d, 15d) del inicio del tratamiento. Los niveles de calcitonina fueron determinados mediante western blot. La intensidad del dolor se midió mediante escala analógica visual. Resultados: Los niveles de calcitonina fueron mayores en el lado de presión respecto al control a los 7 días (p igual a 0.014). Comparaciones intragrupo mostraron un incremento de CT entre 1h y 7d (680.81 mas menos 1672.60 pg/30s, p igual a 0.010) en el lado de presión. No se encontraron cambios significativos en el lado de tensión y control. Los niveles de calcitonina y la intensidad del dolor se asociaron inversamente durante el período desde las 24h a los 15d (r igual a -0.54, p igual a 0.05). Conclusiones: Los niveles de CT en GCF aumentaron significativamente en el lado de presión al poco tiempo de aplicar fuerzas ortodóncicas. Estos cambios se asociaron inversamente con el dolor dental percibido durante el período comprendido entre 24h y 15d. Tercero: Objetivo: Someter a prueba dos soluciones tampón para obtener un análisis fiable y reproducible de citoquinas inflamatorias (IL-1be, IL-6, TNF-¿, OPG, OPN, OC), en fluido gingival crevicular (GCF) mediante citometría de flujo. Material y Métodos: Se recogieron muestras de GCF de voluntarios sanos con puntas de papel y se diluyeron en una solución tampón fosfato salina (PBS) o en otra solución tampón tris hidrocloruro (Tris-HCl), con o sin la adición de inhibidores de proteasas. Se llevó a cabo un inmunoensayo para cotoquinas mediante citometría de flujo (Luminex Xmap200) generando curvas estándares. Resultados: Las curvas estándares generadas con el uso de PBS demostraron mejores ajustes para niveles de IL-1b, IL-6 y TNF-¿, al compararlas con las correspondientes al uso de Tris-HCl (p menor que 0.05). Conclusiones: El uso de la solución tampón PBS con la adición de inhibidores de proteasas proporcionó mediciones fiables de biomarcadores inflamatorios en muestras de GCF de voluntarios sanos.